2.2取材及标本制备 新鲜组织标本：将小鼠快速脱颈椎处死，冰浴下剥离海马，将其置于EP管中，储存于-180 ℃液氮罐中以备Western blot蛋白印迹实验所用，每组各6只，左右海马。石蜡切片：末次行为学测试后，将小鼠灌杀，以多聚甲醛进行心脏灌注，之后取材、固定，将固定好的小鼠进行脑脱水、石蜡包埋、切片。每只小鼠脑于海马CA1区连续冠状切片，每张切片厚4 μm，每组各6只。

    2.3免疫组织化学检测及分析 按说明书对相邻部位的脑片进行免疫组化染色。每只小鼠选取5张脑片，在20倍物镜下观察，记数海马CA1区内染色阳性神经细胞数目；并使用Image-pro Plus图象分析系统采集图像并进行分析，记录每组图像阳性细胞数及其平均灰度值。灰度值分为256(0～255)个，此指标反映的是一个点的颜色深浅程度，灰度值越小，颜色越深。

    2.4Western blot检测 蛋白质提取、蛋白质电泳、转膜、杂交、显色，转膜时应蛋白面朝上，置于洁净保鲜膜上。将配制的发光检测液小心的用吸管转移到蛋白膜上，使其均匀覆盖，室温孵育1～2 min，避免出现气泡(或将气泡赶出)，继而固定在X线片暗盒内(此过程需要在暗室内进行 ......